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elisa检测竞争法操作步骤-j9九游会真人游戏第一品牌赢

放大字体  缩小字体   日期:2022-09-27 21:10:24  浏览量:345   

竞争法是一种较少用到的elisa检测机制,一般用于检测小分子抗原,其原理:将特异性抗体包被于固相载体表面,经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,另一组只加酶标记抗原,经孵育洗涤后加底物显色,这两组底物降解量之差,即为所要测定的未知抗原的量。

其操作步骤为:

1. 将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体

2. 加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结

3. 加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结,即所谓竞争法之由来。

4. 洗去检体与带有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,当检体中抗原量越多,代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少,显色也就越浅。

5. 当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原,或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时,一般会考虑使用竞争法elisa。




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